这段文本描述了实验中使用的细胞系及相关操作。具体而言，MEC-1/OVA和B16F10/OVA靶细胞被用来稳定表达钙传感器GCaMP6s29，通过lentiviral转导进行基因转染。为了选择稳定表达的细胞，使用了blasticidin (10 µg/ml)进行筛选，并通过流式细胞术（FACS）对GCaMP6s阳性细胞进行分选。pCDH-NLS-copGFP-EF1-BlastiS是一个含有NLS-GFP报告基因的载体，在Jan Lammerding的贡献下获得（Addgene plasmid #132772）。Histone-2B-mCherry表达的B16F10/OVA细胞经过lentiviral转导，表达NLS-GFP并使用blasticidin (10 µg/ml)进行选择，并通过流式细胞术对双阳性GFP和mCherry表达的细胞进行分选。Apple-53BP1trunc64是Ralph Weissleder提供的礼物（Addgene plasmid #69531），用于稳定地表达Apple-53BP1trunc在B16F10/OVA细胞中。通过puromycin (2 µg/ml)筛选稳定积分构建物，并通过流式细胞术对Apple阳性细胞进行分选。已经对分选后的细胞进行亚克隆，并将三个亚克隆池化以实现均一的报告基因表达水平。
内容由零声教学AI助手提供，问题来源于学员提问
